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為了建立基于QPCR的快速方法檢測米飯中產嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌,首先采用煮沸法提取蠟樣芽孢桿菌基因組DNA,并利用普通PCR方法驗證引物特異性,然后通過在米飯樣品中添加目標菌,模擬受污染的實際樣本,用QPCR技術定量檢測米飯中產嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌。結果表明該方法具有快速、特異性強、靈敏度高和穩(wěn)定性好的優(yōu)點,能對產嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌定量。不經過增菌培養(yǎng),實際樣品的檢測限為9.8×101CFU/g;經過2 h的增菌培養(yǎng),檢測限能達到100CFU/g;并且米飯中添加其他雜菌后,不影響對蠟樣芽孢桿菌的檢測。建立的QPCR方法適用于米飯等相關淀粉類食品中產嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌的檢測,從而為監(jiān)測該菌所致食品污染以及早期相關食物中毒提供快速定量檢測方法。
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